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脂肪干细胞无血清培养基的应用!

2021-05-21作者:百欧博伟浏览次数:71  来源:北京百欧博伟生物技术有限公司

脂肪干细胞无血清培养基的应用!


一、背景


脂肪干细胞无血清培养基根据细胞的生长需要,培养基包含必需和非必需氨基酸、维生素、有机和无机化合物、激素、生长因子、微量矿物质、血清替代物以及其他补给成分,非常适用于培养哺乳类脂肪干细胞。产品严格无菌,无病毒和支原体,性能稳定,使用该培养基能使干细胞在理想营养平衡状态下进行多代扩增而不发生分化(至少10代以内)。


脂肪干细胞无血清培养基提供结合蛋白、多肽类物质、维生素和微量元素参与细胞代谢,可以起到供应营养、中和、解毒的效果。该培养基不含动物血清,不含动物血清内潜在动物源性内毒素或病毒,方便应用于临床。


脂肪干细胞adipose-derived stem cells,ADSCs)是从脂肪组织中分离得到的一种具有多向分化潜能的干细胞。主要恢复组织细胞的修复功能,促进细胞的再生,恢复年轻面容的同时,身体机能也得到充分改善,有效改善亚健康、早衰等疾病,由内而外真正的有效抵抗衰老。


脂肪组织在人体内储量丰富,通过抽脂从中获得的大量脂肪干细胞(ADSCs),有自我更新增殖及多向分化潜能,可向脂肪细胞、软骨细胞、肌细胞、成骨细胞、神经细胞、神经胶质细胞及胰岛细胞分化,而且可分泌多种促血管生成因子和抗凋亡因子而抗炎、抗氧化,可抵抗氧自由基的损伤,有望成为修复受损的组织和器官的干细胞来源。


二、应用


用于脂肪干细胞移植促进扩张皮肤再生的实验研究:


观察ADSCs移植是否可以促进扩张皮肤再生,并探讨其机制。


实验方法(1)观察培养ADSCs的上清液对成纤维细胞迁移、增殖及I型胶原基因表达的影响;


(2)建立大鼠组织扩张模型,根据移植细胞的不同,将大鼠分为ADSCs组、成纤维细胞组、对照组。每周注水2次,保持扩张器囊内压为60mmHg。扩张4w后统计三组扩张量、扩张面积及回缩率;


(3)分别收取1w、2w、4w时的扩张皮肤,观察各组皮肤厚度及皮肤中增殖细胞的数量、胶原含量、血管密度、巨噬细胞及肌成纤维细胞密度;


(4)体外诱导ADSCs向内皮细胞和表皮细胞分化,并将BrdU标记的ADSCs回植入体内4w,观察移植细胞的成活情况及分布;


(5)观察ADSCs和成纤维细胞中及各组扩张皮肤中VEGF、EGF及bFGF基因及蛋白的表达。


实验结果(1)培养ADSCs的上清液可以促进成纤维细胞的迁移、增殖和I型胶原基因表达,其效果呈现剂量依赖性;


(2)ADSCs移植后组织扩张量和扩张面积均增加,而回缩率减小;扩张结束后ADSCs组各层皮肤厚度均高于其余两组,而纤维囊的厚度未出现统计学差异;


(3)ADSCs组扩张皮肤中增殖细胞数量增多,主要出现于表皮基底层和毛囊中;ADSCs组扩张皮肤中含有更多的羟脯氨酸,胶原排列也更致密;扩张结束后ADSCs组的毛细血管密度高于其余两组;7d时ADSCs组皮肤中的巨噬细胞密度和14d时的肌成纤维细胞密度和其余两组无统计学差异。


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