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宛氏拟青霉菌种的复苏与培养方法!

2021-07-09作者:百欧博伟生物浏览次数:82  来源:北京百欧博伟生物技术有限公司

宛氏拟青霉菌种的复苏与培养方法!



宛氏拟青霉Paecilomyces属的微生物,原产地为中国。菌落暗淡褐色或黄褐色,索状,间作絮状;小梗15-20×3微米;分生孢子梗一般较短, 小梗轮生;分生孢子呈椭圆形或梭形, 光滑, 一般离散或缠结;分生孢子形成交织的长链,椭圆形至梭形,5-7×2.5-3.0微米,略呈黄色或褐色,壁光滑。主要用途为研究;教学。


一、菌种简介

提供形式:冻干物

拉丁属名:Paecilomyces variotii

中文名称:宛氏拟青霉

拉丁名称:Paecilomyces variotii

来源历史:←四川省食品发酵工业研究设计院菌种站分离 (3.843)

收藏时间:2008/11/5

原始编号:22—2

原产国:中国

资源归类编码:15151913114

模式菌株:非模式菌株

主要用途:研究;教学;生产

特征特性:CM0085培养基培养2天,菌落生长快,平坦,浅黄色,放射状生长,边缘菌丝白色;培养7天,菌落土黄色,呈放射状向四周生长。分生孢子球形、橄榄形,光滑。化能异养,嗜温,趋酸,好氧。

具体用途:酿酒。

生物危害程度:四类

培养基编号:CM0085

培养基名称:6-7 °Bé米曲汁琼脂(6-7°Bé Koji Extract Agar)

培养基成分:6~7°Bé米曲汁 1.0L,琼脂 15.0g,自然pH。

培养温度:28-30℃

需氧类型:好氧

分离基物:丢糟

采集地:四川泸州一酒厂

保存方法:真空冷冻干燥法

共享方式:公益性共享;资源纯交易性共享;合作研究共享;资源交换性共享

用途:酿酒。

注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。


二、宛氏拟青霉的形态特征

菌落暗淡褐色或黄褐色,索状,间作絮状;小梗15-20×3微米;分生孢子梗一般较短, 小梗轮生;分生孢子呈椭圆形或梭形, 光滑, 一般离散或缠结;分生孢子形成交织的长链,椭圆形至梭形,5-7×2.5-3.0微米,略呈黄色或褐色,壁光滑。


三、宛氏拟青霉的复苏方法

1、从液氮罐中取出安剖;有时因安剖未封严,浸入了液氮,取出后因安剖内液氮迅速气化而发生爆炸,因此应带有防护眼睛和手套。

2、迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上盖并不时摇动,尽快解冻。

3、剪开纱布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,净化台上打开盖,用吸管吸出细胞悬液,装入离心管中,再补加10ml培养液,吹打使细胞悬浮。

4、低速离心(500~1000转/分)5分钟,取上清后再重复用培养液漂洗、离心。

5、加入培养液适当稀释后,再移装入培养瓶中,置温箱培养,次日更换一次培养液后再继续培养。


四、宛氏拟青霉的培养方法

1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种(一级种)、原种(二级种)和栽培种(三级种)三级。工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。

2、挑选具有某种能力的有用菌种,也称种子制备,是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。

3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。

4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25℃(或较高温度)下培养5~7天(或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子(对于霉菌类孢子制备,多数采用大米、小米之类的天然培养基)。

5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。

6、如果有些生产菌种不产孢子,如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米浆),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。


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