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小鼠肾上腺皮质瘤细胞的应用!

2021-07-23作者:百欧博伟生物浏览次数:224  来源:北京百欧博伟生物技术有限公司

小鼠肾上腺皮质瘤细胞的应用!


一、背景


小鼠肾上腺皮质瘤细胞是一株能分泌鼠类甾类激素、分泌型肾上腺皮质激素的细胞系。


肾上腺皮质是构成肾上腺外层的内分泌腺组织。它能分泌由数种类固醇混合而成的肾上腺皮质激素,皮质内还含有为数更多的类固醇。肾上腺皮质由3层构成,最外层为球状带(zona glomerulosa),接着为占大部分的束状带(zona fasciculata),内层为网状带(zona seticularis)。其功能异常可以引起肾上腺皮质功能亢进、肾上腺皮质功能减退、肾上腺皮质增生等。


肾上腺皮质的组织结构可以分为三层,自外向内分为球状带、束状带和网状带。球状带腺细胞排列成短环状或球状。这一层较薄,主要分泌盐皮质激素,人主要为醛固酮。束状带位于皮质中间,腺细胞排列成垂直于腺体表面呈束状。这层较厚,构成皮质的大部分。网状带位于皮质最内层,腺细胞排列不规则。


肾上腺皮质癌(adrenocortical carcinoma)甚少见,一般为功能性,发现时一般比腺瘤大,重量常超过100g,呈浸润性生长,正常肾上腺组织破坏或被淹没,向外侵犯周围脂肪组织甚至该侧肾。小的腺癌可有包膜。切面棕黄色,常见出血、坏死及囊性变。镜下分化差者异型性高,瘤细胞大小不等,并可见怪形核及多核,核分裂像多见。


二、应用


用于类固醇生成因子-1及DAX-1与肾上腺皮质肿瘤研究:


检测SF-1、DAX-1mRNA在肾上腺皮、髓质肿瘤以及正常肾上腺皮质中的表达,初步探讨SF-1、DAX-1在肾上腺肿瘤尤其是醛固酮分泌瘤中的作用。


方法:1、用TRIZOL分别提取肾上腺醛固酮分泌瘤(APA,n=17),包括血管紧张素Ⅱ(AⅡ)无反应的醛固酮分泌瘤(AⅡ-U-APA,n=12)和血管紧张素Ⅱ有反应的醛固酮分泌瘤,(AⅡ-R-APA,n=5)、肾上腺醛固酮皮质癌(n=2)、肾上腺皮质醇分泌瘤(n=10)、肾上腺无功能瘤(n=10)、肾上腺嗜铬细胞瘤(PHEO,n=6)和正常肾上腺皮质(n=8)组织的总RNA;


2、实时荧光定量PCR方法检测上述不同组织中SF-1、DAX-1、ACTH-R基因和内参照β-actin mRNA的表达;


3、比较SF-1、DAX-1、ACTH-R mRNA在上述不同组织中的表达差异,并与肾上腺皮质肿瘤患者的临床资料行相关性分析。


结果:1、SF-1 mRNA在肾上腺皮质肿瘤中的表达1)在APA中表达和正常肾上腺皮质相比无明显统计学差异,SF-1/β-actin mRNA比值分别为23.89±3.17(AⅡ-U-APA)、21.59±3.00(AⅡ-R-APA)和24.58±2.45(正常肾上腺皮质)(p>0.05);


2、在皮质醇分泌瘤中表达(14.17±2.80)明显低于正常肾上腺皮质及APA,差异有明显统计学意义(p均<0.01);


3、在肾上腺无功能瘤中表达(36.38±3.50),明显高于正常肾上腺皮质、APA和皮质醇分泌瘤(p均<0.01);4)2例肾上腺分泌醛固酮的肾上腺皮质癌中表达(分别为38.75和44.16)有明显高于其他各组的趋势。


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